液體ECC顯色培(péi)養(yǎng)基使(shǐ)用(yòng)說明書

可同時(shí)對水樣中β-葡萄(táo)糖醛(quán)酸(suān)酶陽(yáng)性(xìng)大腸杆(gān)菌(jūn)和(hé)大腸菌群檢(jiǎn)測(cè)和(hé)計(jì)數(shù)

組 分(fēn)

蛋白腖(dòng)和(hé)酵母(mǔ)粉：16.0 g/L   氯化鈉(nà)：5.0 g/L  色素(sù)：4.5 g/L

pH值 7.1

操作
1，取瓶內幹粉25.5 g溶於(yú)1000mL去離(lí)子(zǐ)水(shuǐ)的(dí)潔淨三(sān)角瓶中
，充分攪(jiǎo)拌混(hùn)匀
。也可根據(jù)需要按照25.5 g/L的比例擴大(dà)或縮小(xiǎo)製(zhì)備培養基(jī)的量(liáng)
。

2，加(jiā)熱(rè)至100℃
，不(bù)停攪拌(bàn)
，使其*溶(róng)解(jiě)
。切勿(wù)加熱超過100℃
，切勿121℃高(gāo)壓滅菌(jūn)
。若使(shǐ)用微(wēi)波爐加熱(rè)
，應將培養(yǎng)基加熱沸騰(téng)
，立(lì)即移(yí)出(chū)
，輕(qīng)輕(qīng)搖匀
，再(zài)放(fàng)入(rù)微波爐(lú)加熱
，觀察小(xiǎo)氣(qì)泡變為(wéi)大氣(qì)泡(pào)
，直(zhí)至(zhì)*溶解(jiě)即(jí)可
。切(qiē)勿使培養(yǎng)基溢(yì)出
。
3，冷卻至室溫備用(yòng)
。

接種(zhǒng)

     樣品(pǐn)（如(rú)水(shuǐ)樣）可(kě)按以下(xià)步驟進(jìn)行(háng)：

• 將墊片A放於培養皿(mǐn)內
  。       

• 用移液管移(yí)取2.0 ml製備好的(dí)培養(yǎng)基加入墊片A上
  。

• 取出膜(mó)B
  ，將(jiāng)膜B置於(yú)過(guò)濾係(xì)統(tǒng)中
  。

• 將(jiāng)水(shuǐ)樣置於過(guò)濾(lǜ)係統中抽濾
  。

• 取出(chū)抽濾(lǜ)後的(dí)膜B
  ，將膜(mó)B放於含有(yǒu)墊(diàn)片(piàn)A的培養(yǎng)皿(mǐn)內
  。

• 將(jiāng)含(hán)有A和B的(dí)培養(yǎng)皿置於35±2℃恒(héng)溫培(péi)養(yǎng)箱(xiāng)中培養(yǎng)18-24h後(hòu)即可讀取結(jié)果(guǒ)（注(zhù)：不要倒置培(péi)養皿）
  。

結果

性(xìng)能及局限

對(duì)大(dà)腸杆(gān)菌靈敏(mǐn)度(dù)和特異(yì)性分(fēn)別(bié)為99.1%和96.9%（Ho and Tam 1997）
。葡萄糖醛酸(suān)酶陰性(xìng)大腸(cháng)杆(gān)菌（如(rú)：大(dà)腸杆(gān)菌O157）可(kě)能出(chū)現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)
，如果主(zhǔ)要研(yán)究(jiū)病原菌如(rú)大腸杆菌O157
，可(kě)選用科(kē)瑪嘉(jiā)大腸(cháng)杆(gān)菌(jūn)O157顯(xiǎn)色培養(yǎng)基(jī)
。若研(yán)究主要(yào)研究(jiū)總大腸菌(jūn)群
，罕見的哈(hā)夫尼菌屬出(chū)現假(jiǎ)陰性結(jié)果(guǒ)
，為(wéi)無(wú)色(sè)菌落
。

貯存(cún)條(tiáo)件(jiàn)

幹(gān)粉需(xū)保存於15℃30℃幹燥環境(jìng)中
，在有效期前(qián)使用
。製(zhì)備好的(dí)液(yè)體培(péi)養基(jī)在冰(bīng)箱內(nèi)保(bǎo)存2周(zhōu)（2℃~8℃
，避(bì)光）
。

汙(wū)染處(chǔ)理

使用過(guò)的(dí)培(péi)養基需要(yào)在(zài)121℃滅菌至少20分鐘(zhōng)才(cái)可(kě)以(yǐ)按照(zhào)有關(guān)規定(dìng)丟棄
。