改(gǎi)良科瑪嘉(jiā)O157顯色培養基(jī)使用說明書

組分

科瑪(mǎ)嘉O157顯(xiǎn)色培養基一瓶，添加(jiā)劑A和(hé)B各(gè)一(yī)支。

瓊(qióng)脂 15.0 g/L   蛋(dàn)白(bái)腖(dòng)和酵母粉 13.0 g/L   色素1.2 g/L

pH值 6.9±0.2℃

操 作
1，取(qǔ)瓶(píng)內幹粉29.2g溶(róng)於1000mL去離子(zǐ)水(shuǐ)的潔(jié)淨三角(jiǎo)瓶中(zhōng)，充(chōng)分(fēn)攪(jiǎo)拌混(hùn)匀。也(yě)可(kě)根據(jù)需(xū)要(yào)按照29.2 g/L的(dí)比例擴(kuò)大或(huò)縮(suō)小(xiǎo)製備培(péi)養基的量(liáng)。

2，加熱(rè)至100℃，不停攪拌，使其*溶解。切(qiē)勿(wù)加熱(rè)超過100℃，切勿121℃高壓(yā)滅菌(jūn)。若(ruò)使用微(wēi)波(bō)爐(lú)加(jiā)熱，應(yīng)將(jiāng)培養(yǎng)基(jī)加(jiā)熱沸騰(téng)，立(lì)即移出(chū)，輕(qīng)輕搖匀，再放(fàng)入微波爐加熱，觀(guān)察小(xiǎo)氣(qì)泡變為大(dà)氣泡(pào)，直至*溶(róng)解即可。切勿使培(péi)養(yǎng)基溢(yì)出。
3，加熱後(hòu)的(dí)培養基(jī)冷(lěng)卻至(zhì)45℃~50℃，輕輕地(dì)搖(yáo)動均匀，傾注(zhù)平皿，使(shǐ)其凝固(gù)，晾(liàng)幹備用(yòng)。

對於汙染(rǎn)較為嚴重(zhòng)的樣(yàng)品(pǐn)，使(shǐ)用(yòng)添(tiān)加劑可(kě)增(zēng)強CHROMagar O157顯色(sè)培(péi)養(yǎng)基的選擇性：

       在添加劑(jì)A中加(jiā)入(rù)1ml無(wú)菌水，在添加(jiā)劑B中(zhōng)加入1ml 95%乙(yǐ)醇(chún)，輕(qīng)輕(qīng)搖(yáo)動(dòng)或放(fàng)置(zhì)於37℃水浴中，待(dài)內容物全(quán)部溶(róng)解方(fāng)可使(shǐ)用。然後(hòu)以無菌(jūn)操作(zuò)分別(bié)加入(rù)到(dào)冷卻(què)至(zhì)45℃~50℃的(dí)培養基(jī)中(zhōng)，輕輕混匀(yún)。（添加劑A，B各1ml，用(yòng)於(yú)1000ml培養基，可按比例(lì)放大(dà)或縮小(xiǎo)，剩(shèng)餘的(dí)添加(jiā)劑可以保存在-20℃冰箱(xiāng)中，有效(xiào)期為(wéi)半年(nián)）。

保存  該(gāi)成品(pǐn)平(píng)板在室溫(wēn)可(kě)保(bǎo)存(cún)一天或在冰箱內貯存2周(zhōu)（2℃~8℃，避(bì)光(guāng)）。

接(jiē)種

劃(huá)綫或塗(tú)布接種（冰箱內(nèi)保存的(dí)平板使(shǐ)用(yòng)前應恢復至室(shì)溫），在(zài)36

±1℃恒溫(wēn)條(tiáo)件(jiàn)下有氧培養18-24h。

結果

性能及(jí)局限(xiàn)

   大(dà)腸杆菌O157靈敏(mǐn)度為(wéi)98%（Bettelheim et al. 1998）。但缺(quē)乏亞碲酸鉀時(shí)，各(gè)種非(fēi)大腸杆菌O157菌株可以出現(xiàn)相同顏色(sè)的菌(jūn)落（如沙門氏菌）。建議通(tōng)過乳膠試(shì)驗驗證可(kě)疑菌落。大(dà)腸杆(gān)菌O157的(dí)鑒(jiàn)定需(xū)要做血清學(xué)實驗。

貯(zhù)存條(tiáo)件(jiàn)

幹(gān)粉(fěn)需(xū)保存(cún)於(yú)15℃~30℃幹(gān)燥(zào)環境(jìng)中(zhōng)，在(zài)有(yǒu)效期前(qián)使用(yòng)。

汙染處理(lǐ)

使(shǐ)用過(guò)的(dí)培養基需要在(zài)121℃滅菌(jūn)至(zhì)少20分鐘才(cái)可(kě)以按(àn)照有(yǒu)關規定丟(diū)棄。

附(fù)：供(gōng)體外診斷(duàn)使用(yòng)，產品(pǐn)須(xū)專業人員(yuán)操作(zuò)。