【儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn)及有(yǒu)效(xiào)期】
2~8℃儲存(cún)，有效期為 12 個(gè)月(yuè)。
【適(shì)用(yòng)儀器】
-
麥(mài)氏(shì)標準(zhǔn)比(bǐ)濁(zhuó)管 (Ref. 70 900) No. 0.5
-
API 20 NE 分析(xī)鑒(jiàn)定(dìng)係統 (Ref.20 090) 或 apiweb™鑒定(dìng)軟(ruǎn)件 (Ref.40 011) (咨詢(xún)生物梅(méi)裏埃(āi))
【樣本要(yào)求(qiú)】
API 20 NE 不(bù)直接(jiē)用於(yú)臨床或其他標本。
按照(zhào)標準微生物(wù)學技(jì)術，必須首先在適(shì)合的(dí)培(péi)養(yǎng)基（如胰蛋(dàn)白(bái)酶(méi)解(jiě)酪(lào)蛋白(bái)）上(shàng)分離要鑒定的微(wēi)生物(wù)。
【檢(jiǎn)驗方(fāng)法】
氧(yǎng)化(huà)酶試(shì)驗(yàn)
必須按(àn)照生(shēng)產(chǎn)商(shāng)的使用說明(míng)，進(jìn)行氧(yǎng)化酶(méi)試驗。應當(dāng)在(zài)結(jié)果單上(shàng)記錄(lù)結果，因(yīn)為(wéi)它是最後(hòu)圖譜(pǔ)的一(yī)個有
機部(bù)分（第(dì) 21 個鑒定試(shì)驗）。
菌落(là)
API 20 NE 隻(zhī)應用於不屬於(yú)腸杆菌科(kē)的非(fēi)苛養革蘭(lán)陰性杆菌。
注(zhù) 1：有些非腸道的(dí)革蘭(lán)陰性杆(gān)菌亦為氧化酶(méi)陰性（嗜麥芽黃單(dān)胞(bāo)菌(jūn)，不動杆(gān)菌(jūn)…）。這些微生物(wù)也可以
用 API 20 NE 鑒(jiàn)定(dìng)，但(dàn)必須根(gēn)據其(qí)它細菌(jūn)學(xué)或臨(lín)床標(biāo)準(zhǔn)加(jiā)以選(xuǎn)擇。
注 2：對營(yíng)養(yǎng)要求多或需要適(shì)當處理注(zhù)意(yì)事(shì)項的(dí)苛養微生物(wù)（如布魯氏(shì)菌和弗(fú)朗(lǎng)西絲(sī)氏菌），未(wèi)包含在(zài) API
20 NE 的數據庫(kù)內。必(bì)須采用(yòng)其他(tā)方法排除或(huò)證實它們的存在。
試條的準備
準(zhǔn)備(bèi)一(yī)個培(péi)養盒，盤和(hé)蓋子(zǐ)，向盤的(dí)底部倒(dǎo)入約(yuē) 5mL 蒸餾水(shuǐ)或去離子(zǐ)水(shuǐ)【或任何不含添加劑或可(kě)能釋(shì)放(fàng)
氣體（如(rú)氯氣，二氧化(huà)碳等）的化學物的(dí)水(shuǐ)】，創造(zào)一種(zhǒng)濕氣。在(zài)盤(pán)的邊緣部分(fēn)記錄(lù)標(biāo)本編(biān)號。（不要在(zài)蓋上
記(jì)錄編(biān)號，因為在(zài)操(cāo)作(zuò)期間它(tā)可能(néng)錯位。）從(cóng)各(gè)個(gè)包裝中取(qǔ)出(chū)試劑(jì)條。將試劑條放入培養(yǎng)盒中(zhōng)。
接(jiē)種(zhǒng)物的(dí)準(zhǔn)備
按(àn)照本(běn)產品說明(míng)書“警告(gào)和注(zhù)意事項(xiàng)"段落(là)所(suǒ)示，打開(kāi)一安瓿 API NaCI 0.85 %培(péi)養基（2 mL），或(huò)使(shǐ)
用含(hán) 2 mL 不(bù)含添(tiān)加劑的(dí) 0.85 %生理(lǐ)鹽溶(róng)液。
使(shǐ)用(yòng)吸(xī)管或(huò)滴(dī)管，通過抽吸(xī)或(huò)通過連續(xù)接觸(chù)，從(cóng)瓊(qióng)脂糖培(péi)養基上挑取 1 - 4 個形態相(xiāng)同(tóng)的克隆(lóng)。建(jiàn)議(yì)
使用(yòng)早(zǎo)期(qī)培養物（18 - 24 小(xiǎo)時）。
配製(zhì)混懸(xuán)液(yè)至濁(zhuó)度(dù)等於 0.5 McFarland。此混(hùn)懸液在配製(zhì)後(hòu)必須立即使用。
注：調整(zhěng)接種物(wù)密度(dù)至 0.5 McFarland 非常重(zhòng)要；否則(zé) API 20 NE 試(shì)劑(jì)條(tiáo)試驗(yàn)可(kě)能不(bù)能(néng)正(zhèng)確(què)發(fā)揮功能。
特別(bié)是，較弱的(dí)接種(zhǒng)物(wù)可能(néng)導致(zhì)假(jiǎ)陰性(xìng)結果。在操作(zuò)試(shì)劑條(tiáo)的過程中(zhōng)，不(bù)要(yào)接觸反應杯，接種後不(bù)要將試劑(jì)
條長(cháng)時間暴(bào)露(lòu)空氣。
試(shì)條(tiáo)的(dí)接種
用同(tóng)一(yī)根吸管(guǎn)將(jiāng)鹽水混(hùn)懸液加到(dào)試驗(yàn)管（不是反(fǎn)應(yīng)杯），接種(zhǒng)試(shì)驗 NO3到 PNPG。將(jiāng)試劑條(tiáo)稍(shāo)前傾，將(jiāng)吸
管(guǎn)或滴管的頂部靠在(zài)杯的(dí)側(cè)麵，以避免管(guǎn)的(dí)底(dǐ)部形成(chéng)氣泡。非(fēi)苛(kē)養非腸道革蘭氏(shì)陰(yīn)性杆菌鑒(jiàn)定試劑盒（比色法(fǎ)） 版本(běn)號 07615K -CN –2009/11
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按(àn)照(zhào)“警告(gào)和(hé)注意(yì)事(shì)項(xiàng)"中所(suǒ)示(shì)，打開(kāi) 1 個 API AUX 培養(yǎng)基安瓿，向安瓿加(jiā)入約 200 L 剩餘的鹽(yán)混懸液。
用(yòng)吸(xī)管混(hùn)匀(yún)，避(bì)免形成(chéng)氣(qì)泡。
用(yòng)混懸液(yè)注滿由 GLU 至 PAC 試驗(yàn)管和(hé)杯。當心液麵必(bì)是平的(dí)或(huò)稍(shāo)凸，不能呈(chéng)凹(āo)或新月形。杯子裝得不
滿(mǎn)或(huò)過(guò)滿可能(néng)給(gěi)出不正確的(dí)結(jié)果。
向 3 個(gè)下劃綫試驗（GLU，ADH 和(hé) URE）的杯(bēi)子(zǐ)加礦物油，直至形(xíng)成凸出(chū)的(dí)新(xīn)月形。
蓋上(shàng)培養(yǎng)盒，在 29°C ± 2°C 培養 24 小時（± 2 小(xiǎo)時(shí)）。
【陽(yáng)性判(pàn)斷值(zhí)】
對(duì)於不(bù)同(tóng)生化(huà)反應預期結果(guǒ)的(dí)範(fàn)圍，查(chá)閱(yuè)本(běn)說明(míng)書末尾的鑒(jiàn)別表(biǎo)。
【檢驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
讀取(qǔ)試劑(jì)條
孵育(yù)期後，通過參閱判(pàn)讀表，判讀試(shì)劑(jì)條。
在結(jié)果單上記錄所(suǒ)有自發反(fǎn)應（GLU，ADH，URE，ESC， GEL 和(hé) PNPG）。
為保(bǎo)護同化(huà)反應免(miǎn)受(shòu)空氣播散的汙染(rǎn)，應(yīng)當進行兩(liǎng)個(gè)試驗 NO3 和 TRP 的判讀。要做(zuò)這一點(diǎn)，在 NO3 和(hé)
TRP 試驗(yàn)判讀期間，用(yòng)培養盒蓋子(zǐ)遮(zhē)蓋(gài)同化反(fǎn)應。
NO3 試(shì)驗：
-
各加(jiā)一(yī)滴 NIT1 和(hé) NIT2 試劑至(zhì) NO3 杯。
-
5 分鐘後(hòu)，紅(hóng)色(sè)表示陽(yáng)性(xìng)反應，記錄在(zài)報(bào)告(gào)單上(shàng)。
-
由於氮(dàn)氣的(dí)產(chǎn)生(shēng)（表現(xiàn)為存在小(xiǎo)氣泡(pào)）有(yǒu)可能(néng)引起陰性反(fǎn)應(yīng)：加(jiā) 2~3 mg Zn 試劑到 NO3杯中。
-
5 分(fēn)鐘(zhōng)後，保(bǎo)持無(wú)色的杯(bēi)子表(biǎo)明陽性反(fǎn)應，記錄在報告單(dān)上。如果(guǒ)杯子變(biàn)為粉(fěn)紅(hóng)色(sè)，反(fǎn)應為(wéi)陰性，因為(wéi)管(guǎn)
中存在硝酸(suān)鹽，被鋅還(huán)原(yuán)為亞硝酸(suān)鹽。
用於細(xì)菌(jūn)鑒定(dìng)的反(fǎn)應是(shì)硝酸鹽(yán)還原。當(dāng)上述(shù)二個反應(yīng)（產生(shēng) NO2 或(huò) N2）中(zhōng)的(dí)任(rèn)何(hé)一個為陽性(xìng)時，硝(xiāo)酸鹽
還原反應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)。
但(dàn)是(shì)，N2的產生則可單獨用(yòng)作(zuò)補充試驗（參閱(yuè)分析(xī)圖譜索(suǒ)引(yǐn)）。
檢測：
加 1 滴 JAMES 試劑(jì)。立(lì)即發生反應(yīng)：全杯出現粉紅色(sè)表(biǎo)明(míng)陽性結果，記錄(lù)在(zài)結果單(dān)上。
同化(huà)試(shì)驗：觀察(chá)細(xì)菌(jūn)生長(cháng)。不(bù)透明杯子表明陽性(xìng)反應(yīng)。
偶(ǒu)爾，1 個杯子顯(xiǎn)示為弱生長(cháng)。在這種情(qíng)況，通(tōng)過與(yǔ)試(shì)劑條上(shàng)的其他試(shì)驗(yàn)強度(dù)比較(jiào)，結果(guǒ)應(yīng)當記錄為 或(huò)
±。
注意:
一旦進行了上述(shù)判讀(dú)，如“解釋(shì)"段(duàn)落(là)中所示(shì)，鑒定(dìng)是可(kě)能的。在(zài)下(xià)列情(qíng)況(kuàng)，必須重新孵(fū)育(yù)：
-
無區(qū)別(bié)
-
無法接(jiē)受(shòu)或可疑(yí)的(dí)圖譜(pǔ)；
-
如果(guǒ)對(duì)獲(huò)得的(dí)圖譜標(biāo)注(zhù)了(liǎo)以下備(bèi)注：
在(zài) 48 小時孵(fū)育(yù)前(qián)鑒(jiàn)定(dìng)是無效(xiào)的(dí)
使(shǐ)用(yòng)習(xí)慣或滴(dī)管(guǎn)，通(tōng)過抽(chōu)吸吸走(zǒu) NIT 1，NIT 2 和 JAMES 試(shì)劑，立即用(yòng)礦(kuàng)物(wù)油(yóu)掩蔽(bì)試(shì)驗(yàn) NO3 和(hé) TRP，以便形
成(chéng)凸的新(xīn)月形。在 29°C ± 2°C 重新(xīn)孵(fū)育 24 小(xiǎo)時(shí)，除了隻應在(zài) 24 小(xiǎo)時(shí)判讀(dú)的前(qián) 3 個(gè)試(shì)驗(yàn)（NO3，TRP 和(hé) GLU），
其餘試(shì)驗再(zài)讀一次結(jié)果。
說(shuō)明：
采(cǎi)用(yòng)數(shù)字(zì)譜獲(huò)得鑒定。
測定(dìng)使用率：
在結果(guǒ)表(biǎo)上，將(jiāng)結果分成(chéng) 3 組，每(měi)組(zǔ)標(biāo)記為(wéi)編號 1，2 或 4。在每組(zǔ)內加(jiā)陽(yáng)性反應相應的(dí)數字，得到(dào)一(yī)個(gè)
7 位數；氧(yǎng)化(huà)酶反應構成(chéng)第 21 個(gè)反(fǎn)應，如果(guǒ)為陽性則數值為 4。
鑒定(dìng)：
這采(cǎi)用(yòng)數據庫（V7.0）進(jìn)行
*
棒(bàng)狀杆(gān)菌(jūn)鑒定用編碼冊(cè)
-
查(chá)找圖(tú)譜中(zhōng)的數(shù)字譜(pǔ)。
手(shǒu)機(jī)： 
