梅裏(lǐ)埃VITEK 芽胞(bāo)菌(jūn)鑒(jiàn)定(dìng)卡(qiǎ)(BCL)為完(wán)整的全(quán)自動細(xì)菌(jūn)鑒定和藥(yào)敏分析(xī)係統(tǒng),細菌(jūn)鑒定采用生化反應數碼(mǎ)鑒(jiàn)定原(yuán)理。可以以較(jiào)少(shǎo)的實驗人員及(jí)較短的準(zhǔn)備和(hé)處理時(shí)間(jiān),提供準確的(dí)測定結果。數(shù)據庫(kù)應涵(hán)蓋(gài)革蘭(lán)氏陰性菌,革蘭(lán)氏陽性菌(jūn),芽(yá)胞(bāo)菌,酵母菌,奈(nài)瑟(sè)氏(shì)菌及(jí)嗜血(xiě)杆菌,厭氧(yǎng)菌(jūn);必須(xū)有(yǒu)生物菌的鑒(jiàn)定能力(lì)(鼠疫杆(gān)菌,霍亂弧菌(jūn),吐(tǔ)拉(lā)菌等)。
梅裏埃(āi)VITEK 芽(yá)胞(bāo)菌(jūn)鑒定卡(BCL)方(fāng)法:
1. 菌株分(fēn)離與(yǔ)鑒(jiàn)定(dìng): 將可疑標本(běn)接種於SBA 和(hé)Choc-V 瓊脂(zhī)平(píng)板(bǎn)上(shàng), 置(zhì)5 %CO2 孵箱, 35 ℃培養(yǎng)24 ~72 h 觀(guān)察(chá)結果(guǒ)。細(xì)菌的分離培養和(hé)鑒(jiàn)定(dìng)按(àn)文(wén)獻進(jìn)行, 分離(lí)到(dào)的(dí)菌株經(jīng)塗(tú)片(piàn)革蘭(lán)染色鏡(jìng)檢(jiǎn),觸(chù)酶,氧(yǎng)化酶試驗後, 用VITEK-(NHI 和GNI)鑒定試卡(qiǎ)鑒定(dìng)到種。
2. 氧(yǎng)化(huà)酶試(shì)驗(yàn)。
3. DNA 酶試驗(yàn)。
4. 乙(yǐ)酰酯酶試(shì)驗(yàn):用(yòng)無菌生理鹽水將3-乙酰吲哚紙(zhǐ)片沾(zhān)濕, 取待檢(jiǎn)菌(jūn)落(là)塗在紙片(piàn)上(shàng), 3 min 內(nèi)出現藍綠色為(wéi)陽(yáng)性(xìng)反應(yīng)。以(yǐ)MC 的(dí)ATCC 25238 , 全國(guó)臨床(chuáng)檢驗中心質控菌株(zhū)9602 , 9707 , 0101 作為陽性(xìng)對照。
5. 生(shēng)長(cháng)指(zhǐ)數(GI)測定(dìng): 取經(jīng)Rchoc 平板24 h 培(péi)養(yǎng)的卡他莫拉菌ATCC 25238 菌(jūn)落於(yú)2 ml 無(wú)菌(jūn)鹽水(shuǐ)中, 製成0.5 麥氏(shì)單位菌懸液, 再(zài)用(yòng)無(wú)菌(jūn)鹽水進行1 :10 連續(xù)稀釋, 取(qǔ)10-5 ,10-6 ,10-7稀釋度(dù)菌(jūn)液(yè)100 μl分別接(jiē)種在(zài)9 種培(péi)養(yǎng)基上(Rchoc ,Schoc ,Choc-V ,SBA ,MHA ,MHB ,BCA ,NUA ,ZLA), 分(fēn)別(bié)置(zhì)普(pǔ)通孵箱(xiāng)和(hé)5 %CO2 孵箱(xiāng)各(gè)1 套(tào), 於(yú)35 ℃孵(fū)育24 ,48 ,72 ,96 h ,計數(shù)少於10 個(gè)菌(jūn)落平(píng)板上的菌(jūn)落數, 並用遊(yóu)標(biāo)卡尺量(liáng)出菌落(là)直(zhí)徑, 求(qiú)其(qí)均值(zhí)(mm), 再乘(chéng)以此(cǐ)稀(xī)釋度的對數即得GI。