弧菌(jūn)顯色平板的使(shǐ)用(yòng)經(jīng)驗(yàn)分享
弧菌顯(xiǎn)色(sè)平板是(shì)一(yī)種應用十分廣泛(fàn)的培養基,用於水(shuǐ)產品(pǐn)及(jí)食(shí)物中毒樣品中(zhōng)弧(hú)菌特別是副溶血性弧(hú)菌的分離和(hé)鑒定。
檢(jiǎn)驗(yàn)原(yuán)理(lǐ):
蛋(dàn)白腖和酵母膏粉(fěn)提供(gōng)氮源,維(wéi)生(shēng)素,氨基(jī)酸和碳源;蔗糖為(wéi)可發酵的糖類;抑菌劑抑(yì)製大(dà)部分(fēn)非弧(hú)菌細菌(jūn),氯(lǜ)化鈉(nà)可(kě)維(wéi)持均衡的(dí)滲(shèn)透(tòu)壓(yā);瓊(qióng)脂是(shì)培養基(jī)的(dí)凝固劑(jì);混合色(sè)素與副(fù)溶(róng)血(xiě)性弧菌(jūn),霍(huò)亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌所(suǒ)對(duì)應的酶(méi)發(fā)生特異(yì)性反(fǎn)應,水解(jiě)底(dǐ)物,釋(shì)放(fàng)出顯(xiǎn)色基團(tuán),在淡黃(huáng)色(sè)平板上(shàng)產生(shēng)品紅色(sè)菌落(副(fù)溶血(xiě)性(xìng)弧菌)和綠-藍綠(lǜ)色(sè)的(dí)菌(jūn)落(霍亂弧菌(jūn)和(hé)創(chuàng)傷弧(hú)菌)。
弧菌(jūn)顯(xiǎn)色(sè)平板(bǎn)的實(shí)驗(yàn)內容:
1.稱量→溶化→調(tiáo)pH→過濾→分(fēn)裝(zhuāng)→加塞→包(bāo)紮→滅菌(jūn)→無(wú)菌檢查
2.幹熱滅(miè)菌:裝(zhuāng)入(rù)待滅菌物(wù)品→升溫(wēn)→恒溫→降溫→開(kāi)箱取(qǔ)物
3.高壓(yā)蒸(zhēng)汽滅菌(jūn):加(jiā)水→裝物(wù)品(pǐn)→加蓋→加(jiā)熱(rè)→排冷空(kōng)氣→加壓(yā)→恒壓(yā)→降(jiàng)壓回(huí)零→排(pái)汽(qì)→取物(wù)→無菌(jūn)檢查
4.過濾(lǜ)除菌(jūn):組裝滅菌→連接(jiē)→壓(yā)濾→無(wú)菌(jūn)檢查(chá)→清(qīng)洗滅(miè)菌
弧菌(jūn)顯色(sè)平板(bǎn)注意事(shì)項:
1.使用(yòng)瓊脂糖(táng)需要加(jiā)溫,請(qǐng)做(zuò)好必要的(dí)防護措施,避免燙傷。
2.強烈建議(yì)您(nín)不要將瓊脂糖(táng)粉末直接倒(dǎo)入沸水中,這樣做會引起爆(bào)沸,濺出,致(zhì)使(shǐ)濃度下降,還(huán)會(huì)造(zào)成結(jié)塊而融化(huà)困(kùn)難(nán)。正確的做(zuò)法(fǎ)是稱(chēng)量一(yī)定(dìng)量(liáng)瓊(qióng)脂糖至三角(jiǎo)瓶(píng)中,根據配製(zhì)濃度加(jiā)入一定量(liáng)的(dí)緩衝(chōng)液(yè)(與電(diàn)泳緩衝液(yè)),加蓋矽膠塞(防止溫度(dù)差別(bié)造(zào)成(chéng)表(biǎo)麵結(jié)膜),微波或其他方式(shì)加(jiā)熱(rè)至(zhì)沸(fèi)騰(téng)2分鐘左(zuǒ)右(yòu),戴(dài)手套小心(xīn)取(qǔ)出,搖(yáo)匀,使(shǐ)之*溶解。
3.保(bǎo)證(zhèng)瓊脂(zhī)糖*溶解(jiě),否則(zé)造(zào)成電(diàn)泳條(tiáo)帶不(bù)清,保證*溶(róng)解(jiě)的前(qián)提下,盡量縮(suō)短(duǎn)加(jiā)熱時間。